使用紫外线突变生成与人工光标签相结合,对Aureobasidium pullulans进行高度查,以检测其高β-葡萄糖的产生

科学领域:

• 微生物学 微生物学
• 生物技术是生物技术.
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 乌雷奥巴西迪亚普鲁兰产生β-葡萄糖,一种有价值的外聚糖.
• 目前用于选高产菌株的现有方法是有限的.
• 开发高效的选工具对于改进菌株至关重要.

研究的目的:

• 为生产β-葡萄糖构建一个专门的光选系统.
• 识别和培育具有增强β-葡萄糖产量的A. pullulans菌株.
• 通过基因操纵和选择来提高A. pullulans的整体生产力.

主要方法:

• 利用碳水化合物结合模块-4 (CBM4) 域,因为它对β-1,3-葡萄糖的特异性.
• 开发了一种用于信号生成的双分子光补充试验.
• 在高通量查中采用紫外线突变发生和流细胞计.
• 在高葡萄糖介质中适应菌株,用于选择高产的菌株.

主要成果:

• 成功建立了一种用于检测β-葡萄糖的光探针系统.
• 确定了一种突变菌株,A. pullulans D7,其β-葡萄糖产量增加了65.18% (4.84 g/L).
• 在发酵后观察到β-葡萄糖分子量从7500~5500kDa减少.

结论:

• 开发的光系统使得β-葡萄糖生产者的高通量选能够有效地进行.
• 应变改善策略导致β-葡萄糖的产量显著增加.
• 这项研究证明了一种成功的方法来提高A. pullulans的发酵能力.