使用U2 OS细胞培养器进行活细胞光显微镜的电穿孔细胞测量协议
Thomas Nesmith1, Christian Vieira2, Darius G Rackus1
1Department of Chemistry and Biology, Toronto Metropolitan University; Institute for Biomedical Engineering, Science and Technology (iBEST), a partnership between St. Michael's Hospital, a site of Unity Health Toronto, and Toronto Metropolitan University; Keenan Research Centre for Biomedical Science at St. Michael's Hospital.
Journal of visualized experiments : JoVE
|June 30, 2025
概括
脉冲电场 (PEF) 能够实现基因电转移和癌症治疗. 一个新的系统允许活细胞显微镜跟踪PEF暴露后的细胞周期变化,改进电穿孔技术.
科学领域:
- 生物医学工程 生物医学工程
- 细胞生物学 细胞生物学
- 医学物理 医学物理
背景情况:
- 脉冲电场 (PEF) 在医学研究中至关重要,特别是在基因电转移 (GET) 和电化学疗法 (ECT) 等电穿孔技术中.
- 虽然有效,但当前的电穿孔方法需要先进的辅助技术来进行详细的活细胞分析和提高效率.
研究的目的:
- 开发一种先进的电穿孔细胞测量系统,用长期光显微镜对活细胞进行实验.
- 通过使用FUCCI(CA) 5 U2-OS细胞系来评估PEF暴露的实时细胞周期变化.
主要方法:
- 开发一个电穿孔细胞测量系统与长期光显微镜能力集成.
- 使用稳定表达FUCCI(CA) 5 U2-OS细胞系来监测细胞周期动态.
- 进行了长达30小时的时间缩短显微镜,观察细胞对PEF暴露的反应.
主要成果:
- 实现了长达30小时的时隔显微镜,使细胞活动的实时观察成为可能.
- 细胞循环中因PEF处理而发生的量化阶段特异性变化.
- 证明了该系统能够支持详细的活细胞PEF实验的能力.
结论:
- 开发的电孔细胞测量系统有效支持活细胞PEF实验和长期监测.
- 这项技术为量化PEF诱导的细胞周期变化提供了有价值的工具.
- 这些发现有助于在生物医学研究中推进电穿孔技术.
