循环细胞外囊泡的蛋白质组及其对血小板的功能作用因隔离方法而异

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 蛋白质组学是指蛋白质组学.

背景情况:

• 细胞外囊泡 (EVs) 是细胞间通信的关键媒介.
• 电动汽车是各种疾病的宝贵生物标志物.
• 像超离心法 (UC) 这样的标准隔离方法也有局限性.

研究的目的:

• 为了比较超离心法 (UC) 和尺寸排除染色法 (SEC) 用于隔离来自等离体的EV.
• 确定EVs蛋白质和功能分析的最佳方法.
• 评估单独的EVs对于与血小板相关的功能研究的适用性.

主要方法:

• 使用UC和SEC从血中分离出EV.
• 描述涉及纳米粒子跟踪分析 (NTA),传输电子显微镜 (TEM) 和西部涂抹.
• 使用所有理论质谱的顺序窗口获取 (SWATH-MS) 进行了定量蛋白质组分析.
• 功能性研究评估了血小板聚合.

主要成果:

• SEC-隔离EVs (SEC-EVs) 呈现出更高的颗粒和蛋白质度,更好的颗粒与蛋白质的比率,以及比UC-隔离EVs (UC-EVs) 更小的尺寸.
• 蛋白质组分析确定了171种蛋白质,SEC-EVs (apolipoproteins,细胞外蛋白质) 和UC-EVs (补充蛋白质,免疫球蛋白) 的不同配置.
• SEC-EVs显著增强了血小板聚合,而UC-EVs没有显示任何效果.

结论:

• 对于分离血EV用于蛋白质组和功能研究,特别是血小板聚合试验,SEC优于UC.
• 美国证券交易委员会 (SEC) 衍生的电动汽车为生物标志物发现和功能调查提供了更大的潜力.
• 这种比较分析为未来使用血EVs的临床研究提供了基础.