设计,开发和验证新的光菌株,用于研究口腔链球菌

科学领域:

• 微生物学 微生物学
• 分子生物学分子生物学
• 口腔健康研究研究 口腔健康研究

背景情况:

• 口腔链球菌是口腔健康和疾病的关键参与者.
• 基因工程光细菌菌株对于研究微生物生理学和相互作用至关重要.
• 在混合生物膜中研究口腔 estreptococci 的现有工具是有限的.

研究的目的:

• 为了构建和验证口腔链球菌 (Streptococcus gordonii,Streptococcus mutans,Streptococcus sanguinis) 的新光菌株.
• 为了使细菌生理学,生物膜形成和物种间相互作用的可视化和量化.
• 为混合物种口服生物膜中单细胞水平分析提供工具.

主要方法:

• 对S. gordonii,S. mutans和S. sanguinis进行基因工程,以构成性地产生光蛋白 (mTagBFP2,sfGFP,mScarlet-I3).
• 插入光基因和表胺素耐药性标记物 (aad9) 进入转录无声的染色体开放阅读框架.
• 使用广场和超分辨率共聚焦显微镜以及膜完整性测试,对生物膜的光,可视化和量化进行验证.

主要成果:

• 在研究的菌株中成功生成了蓝色,绿色和红色光的光菌株 (除了S. sanguinis中的sfGFP).
• 来自工程菌株的验证的特定和可检测的光信号.
• 在可视化和定量化生物膜和分析混合物种生物膜方面的证明有用性,显示物种对唾液等环境因素的特定反应.

结论:

• 开发的光口腔 estreptococcal 菌株是研究口腔微生物生态学的宝贵工具.
• 这些菌株促进了细菌生理学,生物膜动力学和物种间相互作用的先进研究.
• 这些工程菌株提高了体外测试的能力,并提高了对口腔健康中的宿主微生物相互作用的理解.