使用3D打印的垂直混合器对双乳液皮克反应器进行连续FACS分类
Zijian Yang1, Samuel Thompson2,3, Yanrong Zhang4
1Department of Radiology, Stanford University, Stanford, CA USA 94350, United States.
Analytical chemistry
|July 2, 2025
概括
研究人员优化了双乳液图反应器,以实现酶导向进化. 这提高了光激活细胞分类 (FACS) 的加载效率和吞吐量,使酶选更容易获得.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 生物化学 生物化学
- 合成生物学 合成生物学
背景情况:
- 微流体图反应器使得酶导向进化的高通量选成为可能.
- 双乳液图反应器 (DE) 使用商业光激活细胞分类 (FACS) 简化了分类.
- 之前的DE方法面临着负载变化和低收益率的挑战.
研究的目的:
- 为了优化双乳液 (DE) 稳定性和负载,以实现高效的FACS分类.
- 通过使用微流体图反应器,提高定向进化的可访问性和吞吐量.
- 克服DE加载速度和产量的障碍,以改善酶发现.
主要方法:
- 优化表面活性剂配方,以提高DE的稳定性.
- 开发了一台3D打印的螺栓塞混合机,用于连续的样品线载荷.
- 利用商业FACS进行分类和分析分类准确度和恢复率.
主要成果:
- 实现了稳定的DE,提高了加载效率.
- 在高频率 (高达480赫兹) 的四个10分钟排序轮中分析了117万个DEs.
- 在模拟分类中证明了高分类精度 (89 ± 1%) 和回收率 (78.0 ± 0.9%).
结论:
- 优化的DE加载条件显著提高了FACS可排序的皮克反应器的吞吐量和易用性.
- 改进的DE方法扩大了定向进化的可访问性,以创建高活性酶.
- 这种方法为酶工程应用提供了可控的体外进化.


