开发双抗体三明治ELISA,用于检测PEDV N蛋白质

科学领域:

• 兽医病毒学 兽医病毒学
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 猪流行性腹病毒 (PEDV) 在猪业中造成重大经济损失,原因是猪猪的传染性和死亡率很高.
• 有效的诊断工具对于控制PEDV疫情和实施根除策略至关重要.

研究的目的:

• 开发和验证针对PEDV核体 (N) 蛋白的新型单克隆抗体.
• 建立一个敏感和特定的双抗体三明治定量ELISA (DAS-ELISA) 用于PEDV检测.

主要方法:

• 使用重组N蛋白制备抗PEDVN蛋白单克隆抗体 (mAbs) 4F2和2G4使用重组N蛋白.
• 通过免疫光试验 (IFA) 和西方布洛特的mAbs的功能性表征.
• 皮质地图绘制和开发用于PEDV检测的DAS-ELISA.

主要成果:

• 两个mAbs,4F2和2G4成功生成和表征.
• mAb 2G4在N蛋白的C端域中识别了一个高度保守的线性表位.
• 开发的DAS-ELISA表现出高灵敏度 (0.05 ng/mL对N蛋白,10^2.59TCID50对病毒) 和针对常见的猪病毒的特异性.

结论:

• 开发的单克隆抗体是PEDV检测的有效工具.
• 新的DAS-ELISA提供了一种敏感和特定的方法,用于快速PEDV诊断.
• 这种诊断试验可以促进在小猪便中检测PEDV,支持根除倡议.