更新的双重光定量RT-PCR测定用于同时检测PRRSV-1和PRRSV-2
Xiaoxiao Tian1, Haojie Wang1, Zeqing Liu1
1State Key Laboratory for Animal Disease Control and Prevention, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin, China.
Frontiers in cellular and infection microbiology
|July 4, 2025
概括
一种新的双重实时定量RT-PCR (RT-qPCR) 方法可以准确检测猪生殖和呼吸系统综合征病毒 (PRRSV) -1和PRRSV-2. 这种敏感的测定方法可以改善对猪的PRRSV检测和监测.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断
- 猪的传染病 猪的传染病
背景情况:
- 猪生殖和呼吸系统综合征 (PRRS) 对全球猪业构成重大经济挑战.
- 持续的PRRSV突变和重组导致现有检测方法频繁出现假阴性,阻碍疾病控制.
研究的目的:
- 开发一种高度敏感和特定的双重实时定量RT-PCR (RT-qPCR) 试验,用于同时检测和区分PRRSV-1和PRRSV-2.
主要方法:
- 设计了针对双重RT-qPCR的ORF6基因的特定原料和探针,与传统的ORF7基方法区分开来.
- 验证了对其他猪病原体的特异性,并确定了检测极限 (LOD) 和变化系数 (CV).
- 用356个临床样本与WOAH推的和商业RT-qPCR套件进行了比较.
主要成果:
- 双重RT-qPCR对PRRSV-1和PRRSV-2表现出高特异性,没有交叉反应.
- 获得了PRRSV-1的8.42副本和PRRSV-2的7.84副本的低LOD,具有很好的测试内和测试间精度 (CVs <1.28%).
- 与参考方法相比,开发的试验显示出明显更高的阳性率,表明灵敏度更高.
结论:
- 成功开发了一种高效,灵敏和准确的双重RT-qPCR方法来检测和区分PRRSV-1和PRRSV-2.
- 这种新型测定适用于在临床环境中有效检测和监测PRRSV.
