关于头癌有机体单细胞解离的协议
Matthew Spence1, Isabel Cioffi2, Yasuto Tomita3
1Vagelos College of Physicians and Surgeons, Columbia University, New York, NY, USA; Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, Columbia University, New York, NY, USA.
STAR protocols
|July 5, 2025
概括
这项研究提供了一种协议,将患者衍生器官 (PDO) 分离到单细胞中. 该方法优化了细胞产量和活力,用于诸如药物查和单细胞RNA测序等应用.
科学领域:
- 在瘤学瘤学.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 头状细胞癌 (HNSCC) 患者衍生器官 (PDO) 是癌症研究的宝贵模型.
- 将PDO分离成单细胞悬浮剂对于下游应用,如药物查和单细胞RNA测序至关重要.
- 现有的协议可能会导致细胞活力和聚合能力降低,从而限制它们的效用.
研究的目的:
- 提出一种可靠的协议,用于将HNSCC PDO分离成可行的单细胞悬浮液.
- 为了优化单细胞产量并保持细胞活力.
- 促进PDO在先进研究应用中的使用.
主要方法:
- 用0.05%的素化PDOs.
- 温和的机械解离技术.
- 使用自动细胞计数器,24小时活细胞成像和流细胞计量评估单细胞产量.
主要成果:
- 该协议成功地从HNSCC PDO中生成了可行的单细胞悬浮物.
- 优化的辛度和温和的解离使单细胞产量最大化.
- 避免高辛度和长时间化,可以防止细胞聚合,并保持细胞活力.
结论:
- 该协议提供了一种可靠的方法,用于从HNSCC PDO中制备单细胞悬浮剂.
- 优化的方法支持下游应用,如药物查和单细胞RNA测序.
- 该协议增强了PDO在转化癌症研究中的实用性.
