在兴奋剂控制领域检测类固醇的不同分析工作流程的可比性
Monica Mazzarino1, Wim Van Gansbeke1, Aðalheiður Dóra Albertsdóttir1
1Doping Control Laboratory, Department of Diagnostic Sciences, Ghent University, Block B, Ottergemsesteenweg 460, Ghent, BE 9000, Belgium.
优化对类固醇的干血点分析需要仔细选择微样本采集设备和提取溶剂. 甲醇和特定衍生试剂为使用LC-MS/MS的类固醇分析提供了高回收率和灵敏度.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 法医毒理学 法医毒理学
- 药理动力学 药理动力学
背景情况:
- 干血点 (DBS) 采样为分析各种分析物 (包括类固醇) 提供了一种最小侵入性的方法.
- 在DBS中精确量化类固醇对于用于兴奋剂控制,临床诊断和药理动力学研究的应用至关重要.
- 提取和衍生协议的优化对于克服与DBS分析相关的挑战至关重要,例如矩阵效应和分析物稳定性.
研究的目的:
- 评估和优化微采样设备,提取溶剂和衍生试剂,用于对DBS中27个类固醇的敏感和准确分析.
- 建立可靠的分析条件,用于查和确认使用液体染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 的类固醇.
主要方法:
- 评估了五种微采样设备:沃特曼DMPK-C,沃特曼903,珀金埃尔默-226,塔索-M20和米特拉®提示.
- 测试八种提取溶剂,包括甲醇和各种有机溶剂混合物.
- 评估三种衍生试剂:吉拉德试剂P,吉拉德试剂T和甲氧胺,然后进行LC-MS/MS分析.
主要成果:
- 甲醇显示出最高的回收率,尽管Tasso-M20与吉拉德试剂一起引起了染色学干扰.
- 米特拉®尖端提供了高提取效率 (>50%) 和最小的矩阵效应 (<25%),优于基于纤维素的设备.
- 吉拉德的试剂P和T提供了高灵敏度,而甲胺则改善了博尔登的衍生性.
结论:
- 对于初始选,建议在DBS中使用甲醇与吉拉德试剂P或T进行类固醇分析.
- 为了确认,建议采用特定化合物的方法,使用甲氧胺用于博尔登和酸,以及吉拉德试剂用于其他物质.
- 由于其效率和低矩阵效应,Mitra®尖端被认为是用于类固醇分析的优质微样采集设备.
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