开发一种无蛋白核酸侧流试验,用于Trichomonas vaginalis

科学领域:

• 分子诊断学 分子诊断学
• 在护理场所进行检测.
• 性传播感染 (STIs) 是一种性传播疾病.

背景情况:

• 由Trichomonas vaginalis引起的三菌是全球最常见的可治愈的非病毒性性传播疾病.
• 现有的诊断方法可能缺乏有效的医疗点查 (POCT) 所需的速度和可访问性.
• 开发快速,敏感和特定的POCT对于管理性传播感染至关重要.

研究的目的:

• 开发和评估一种用于检测Trichomonas vaginalis的新型分子POCT.
• 为了简化诊断,使用无蛋白核酸侧流 (NALF) 试验的复合聚合酶放大 (RPA).
• 评估RPA-NALF测定在临床样本中检测T. vaginalis的性能.

主要方法:

• 开发一种无蛋白核酸侧流 (NALF) 装置,其中包含特定的T. vaginalis DNA原料和重组酶聚合酶放大 (RPA).
• 采用氨基基DNA探针用于安普利康检测,消除了对基于蛋白质的结合物的需求.
• 评估了测试灵敏度,特异性,可复制性和保质期,并对临床基因组DNA提取物和生物银行阴道拭子进行了测试.

主要成果:

• RPA-NALF试验显示出高可重复性,预计在22°C下至少有6.6个月的保质期.
• 该测试需要最小的仪器和操作人员步骤,在大约30分钟内提供结果.
• 该试验检测出高特异性的T. vaginalis,可视识别低至1.3 × 10^3细胞/毫升或282细胞/毫升,并显示与临床样本的培养和qPCR方法一致.

结论:

• 开发的RPA-NALF试验为T. vaginalis检测提供了一种简单,快速和具有成本效益的分子POCT.
• 无蛋白质的设计提高了制造的简单性,可重复性和成本效益.
• 这种测试可以准确地检测临床样本中中等量的T. vaginalis,即使与竞争的微生物DNA和细胞材料.