一种基于LC-MS的简化方法,用于使用可访问的体外代谢模型对DNA添加物的敏感分析

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 毒理学 毒理学 毒理学
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• DNA 修改显著影响细胞功能和完整性.
• 目前的DNA附加分析方法缺乏结构信息,并且通常是复杂的.
• 确定适合可靠的DNA adduct形成的生物系统是具有挑战性的.

研究的目的:

• 开发一个快速,简单和敏感的工作流程,用于DNA附加分析.
• 为了比较不同生物系统的代谢激活能力.
• 通过仪器技术,提供对DNA添加物的结构洞察.

主要方法:

• 利用HepG2细胞和肝脏S9分离物用于致癌物的代谢激活.
• 采用高性能液体染色学与质谱学 (HPLC-MS) 结合用于 adduct 检测.
• 使用六种已知的致癌物质和一种阿里碳化合物受体激动剂进行比较的生物系统.

主要成果:

• G2细胞和肝脏S9分离物显示出有效的代谢激活DNA adduct形成.
• 成功检测到来自阿弗拉托辛B1,子[a]烯,甲基原醇,α-asarone和β-asarone的DNA添加物.
• 首次记录了非转移癌细胞系中非烯胺添加物形成的情况.

结论:

• 开发的工作流程对于敏感的DNA附加分析是高效的.
• G2细胞和S9分离物是适合研究DNA adducts的生物系统.
• 该方法可以检测新型DNA添加物,并提供有价值的结构信息.