用过氧酸激活的条件化学探头用于基于亲和性的蛋白质修饰
Chien-Chi Wu1, Szu-Hsien Lee1, Ting-Ju Huang1
1Department of Chemistry, National Tsing Hua University, 101 Section 2, Kuang-Fu Road, Hsinchu 300044, Taiwan.
Analytical chemistry
|July 10, 2025
概括
我们开发了一种新的条件激活蛋白质标记探针,该探针由过氧酸盐激活. 这种探测器可以在细胞和体内对人类碳酸酶 (hCA) 进行特定标记,并可以检测过氧酸盐.
科学领域:
- 化学生物学 化学生物学
- 生物化学 生物化学
- 分子成像分子成像技术
背景情况:
- 基于亲和性的蛋白质标签依赖于反应性电友,这可能导致不稳定性和非特异性标签.
- 现有的探测器在复杂的生物系统中往往缺乏稳定性和选择性.
研究的目的:
- 开发一种基于条件激活亲和力的蛋白质标签策略.
- 为了创建一个探针激活过氧酸盐的特定蛋白质修改.
- 为了能够在生物系统中检测过氧酸盐.
主要方法:
- 合成了一个探头,含有对过氧酸盐敏感的酸化物,Cy5染料和硫胺对人类碳酸无水酶 (hCA) 的连接物.
- 在活细胞和活体中测试了探头激活和标记特异性.
- 评估了探测器检测巨细胞分泌的过氧酸盐的能力.
主要成果:
- 在细胞和体内体内的过氧酸存在时,实现了对hCA的特异性和快速标记.
- 由于稳定的共价键形成,已证明对蛋白的长期体内成像.
- 显示该探测器可以检测巨细胞分泌的过氧酸盐.
- 与之前的探测器相比,突出了探测器的合成容易性和抗水解能力.
结论:
- 条件激活探头提供了一个稳定和选择性的方法,用于在氧化应激下标记蛋白质.
- 这种新试剂对于研究用过氧酸在生物环境中的蛋白质修饰有价值.
- 该探头在蛋白质标记和过氧酸盐检测方面具有双重目的.
