一种无标签的方法,将染色学丰富与N-终端特异性蛋白解结合起来,可使Tn/sTn糖位素的敏感识别
Zhongyu Wang1,2, Yan Wang1,2, Taiheng Ma3
1State Key Laboratory of Medical Proteomics, National Chromatographic R. & A. Center, CAS Key Laboratory of Separation Science for Analytical Chemistry, Dalian Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Dalian 116023, China.
Analytical chemistry
|July 10, 2025
概括
一种新的无标签方法可以从复杂的蛋白质组样本中敏感地识别Tn和sTn糖,这些关键的癌症生物标志物. 这种方法通过分析蛋白质上的O-甘氨酸,有助于癌症诊断和预后.
科学领域:
- 生物化学和分子生物学
- 葡萄糖和蛋白质组合物和蛋白质组合物.
- 癌症生物标志物发现发现
背景情况:
- Tn (GalNAcα1-O-S/T) 和sTn (Neu5Acα2-6GalNAcα1-O-S/T) 抗原是不成熟的O-甘氨酸,与癌症的攻击性密切相关.
- 这些O-甘氨酸在癌症患者和健康个体之间显示出显著的差异,使它们成为癌症诊断和预后的潜在生物标志物.
- 在蛋白质层面同时分析Tn和sTn糖位素仍然是现有的化学或化学酶方法的挑战.
研究的目的:
- 开发一种新的无标签方法,用于在复杂蛋白质组样本中敏感识别Tn和sTn糖.
- 为了克服与分析临床样本中低丰度O-甘氨酸相关的挑战.
- 建立一种广泛适用的和敏感的技术,用于分析癌症生物标志物研究的大型临床样本队列.
主要方法:
- 丰富大型三性O-糖,通常携带多个O-糖,使用水友相互作用液体染色学 (HILIC).
- 通过N端特异性蛋白酶消化生成具有单个Tn或sTn抗原的糖.
- 使用无标签方法在N末端识别Tn/sTn糖.
主要成果:
- 证明了该方法对具有挑战性的样本的适用性,包括HeLa细胞和胰腺管道腺癌血清,这些样本含有少量的Tn/sTnO-糖.
- 从136种胰腺癌细胞系和血清中136种蛋白质的200个糖上发现了总共191个Tn/sTn糖.
- 开发的方法被证明是敏感和广泛适用于分析O-糖.
结论:
- 拟议的无标签方法可以从复杂蛋白质组中敏感且同时识别Tn和sTn糖.
- 这种技术非常适合分析具有挑战性的临床样本,包括血清,以发现癌症生物标志物.
- 该方法的广泛适用性和灵敏性使其对大规模临床样本分析和推进癌症诊断和预后非常有价值.
