用LC-MS测量宿主细胞蛋白质量. 实验演示,资格和方法的比较在USP 1132.12.1中
Victor G Chrone1, Anthony J Blaszczyk2, Derrick H Zhang2
1Alphalyse A/S, Odense, DK 5230, Denmark; Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of Southern Denmark, Odense, DK 5230, Denmark.
Journal of pharmaceutical and biomedical analysis
|July 10, 2025
概括
本研究比较了三种液体染色学-质谱学 (LC-MS) 方法来量化生物制品中的宿主细胞蛋白 (HCP),如USP所述. 这些发现为实施这些先进的HCP分析技术提供了实际见解.
科学领域:
- 生物制药开发 生物制药开发
- 分析化学 分析化学
- 蛋白质分析 蛋白质分析
背景情况:
- 宿主细胞蛋白 (HCP) 是生物药物物质中的关键杂质.
- 酶链接免疫吸收试验 (ELISA) 是用于HCP检测的常见方法,但液体染色学质谱法 (LC-MS) 提供了更详细的特征.
- 美国药典 (USP) <2002><202f>1132.1<2002><202f>为HC分析提供了定量LC-MS方法的指导方针.
研究的目的:
- 探索三种用于HPC分析的定量LC-MS策略的实际应用和验证准备.
- 为了比较与产品蛋白,增添蛋白和增添相对方法的性能.
- 为生物制药开发中HCP量化实施USP提供见解.
主要方法:
- 在mAb药物中对两个常见的HCP (集群蛋白,脂蛋白脂酶) 进行定量LC-MS分析.
- 通过用中国汉姆斯特卵巢 (CHO) 细胞培养收获进行化,模拟工艺中的HCP水平.
- 使用ICH Q2 (R2) 验证标准,对三个USP方法 (A-相对于产品蛋白,B-相对于尖端蛋白,C-相对于尖端) 的评估.
主要成果:
- 这三种LC-MS方法均在单一数据集中成功应用和比较.
- 方法性能根据ICH Q2 (R2) 指南对线性,准确性,精度和特异性进行了评估.
- 进行了对每个方法的优点,缺点和适用性的比较评估.
结论:
- 该研究为实施USP <2002><202f>1132.1<2002><202f>用于HP量化提供了实际见解.
- LC-MS是一种对HCP ELISA具有强大的直角方法,提供了详细的HCP信息.
- 这项工作支持LC-MS在确保生物药物的质量和安全方面的日益重要的作用.
