对金属离子诱导的信号不稳定性的基于机制的观点和开发一种强大的LC-MS/MS方法,用于在血中量化 hetrombopag 的微量

科学领域:

• 分析化学 分析化学
• 药理动力学 药理动力学
• 质谱测量质量谱测量

背景情况:

• 黑特罗姆波帕格 (Hengqu®) 是一种口服的血栓形成因子受体激动剂,用于血栓缩和无塑性贫血.
• 在生物样本中精确量化金属敏感异构是由于微量金属干扰而具有分析挑战性的.
• 来自分析系统的微量金属可能会导致峰值形状不佳,尾巴和恢复减少,复杂化异构体分析.

研究的目的:

• 开发一种强大,选择性和敏感的液体染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法,用于在狗血中测定异构素.
• 解决和减轻微金属污染对分析信号稳定性和化合物回收的负面影响.
• 建立一种可靠的方法,用于对异构蛋白的药理学研究.

主要方法:

• 开发了一种LC-MS/MS方法,使用双重策略:6%的酸在酸中防止金属吸附,0.01%的三酸 (TFA) 在移动阶段抑制化.
• 使用了一个InfinityLab Poroshell 120 EC-C18柱子,配有梯度化系统 (0.01% TFA/10 mM氨基酸和H2O:甲醇:异醇与0.01% TFA/10 mM氨基酸).
• 优化柱体温度 (50°C) 和移动相组合 (包括异醇),以改善对异巴与血干扰的分离.

主要成果:

• 开发的LC-MS/MS方法在三个数量级上表现出极好的线性.
• 使用小的血体积 (50μL) 达到0.10 ng/mL的下限量化值 (LLOQ),具有高精度 (RSD ≤8.83%) 和准确性 (88.4-102.2%).
• 在口服后,成功地应用了在 beagle 狗中确定 hetrombopag 血度的方法.

结论:

• 成功开发了一种强大,有选择性和敏感的LC-MS/MS方法,用于在狗血中量化异构巴格.
• 双重策略有效地减少了微量金属干扰,确保了稳定的分析信号和可靠的量化.
• 这种经过验证的分析方法适用于未来的药理动力学研究和对金属敏感化合物的建模,如hetrombopag.