两光子 (2P) 显微镜用于研究Ca2+来自急性脑切片的天体细胞中的信号传递

科学领域:

• 神经科学是一个神经科学.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物物理学的生物物理.

背景情况:

• 天体细胞表现出基于Ca2+的兴奋性,这对大脑功能至关重要.
• 基因编码的Ca2+指标 (GECI) 已经推进了对细胞内Ca2+信号的研究.
• 2光子激光扫描显微镜 (2PLSM) 提供了深层组织成像,减少了光损伤.

研究的目的:

• 描述2PLSM Ca2+成像在小鼠体感皮质急切片中的星细胞中的协议.
• 使用细胞溶液GCaMP6f和针对ER的G-CEPIA1er进行详细的Ca2+信号分析.
• 为了能够在实验条件和模型中比较天体细胞激活.

主要方法:

• 从成年小鼠的ex vivo急性皮质切片.
• 二光子激光扫描显微镜 (2PLSM).
• 基因编码的Ca2+指标:细胞质GCaMP6f和针对ER的G-CEPIA1er.
• 在亚细胞区 (体,过程,微域,ER) 中对Ca2+信号的离线分析.

主要成果:

• 该协议允许表征基底和唤起的天体细胞Ca2+活动.
• 对不同区域的Ca2+信号进行分析,可进行比较研究.
• G-CEPIA1er成像显示了通过ER Ca2+动态来激活metabotropic受体.

结论:

• 这种2PLSM成像协议为研究天体细胞Ca2+信号 in situ提供了一种可靠的方法.
• 该技术有助于详细研究天体细胞功能和Ca2+在健康和疾病中的动态.
• 适应性协议用于光或共聚焦显微镜.