在受伤的脊髓中识别微细胞和外围透性巨细胞,使用流细胞计
Yu-Qing Chen1, Jian-Xiong Gao2, Hua-Zheng Yan2
1Clinical Laboratory, the First Affiliated Hospital of Bengbu Medical University; Department of Biochemistry and Molecular Biology, School of Laboratory Medicine, Bengbu Medical University.
Journal of visualized experiments : JoVE
|July 14, 2025
概括
在脊髓损伤 (SCI) 后,区分微质细胞 (MG) 和巨细胞 (Mø) 是一个挑战. 这项研究提出了一种流细胞计法,以根据特定标记物的表达来识别M1/M2类的MG和Mø表型.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 微质细胞 (MG) 和外围巨细胞 (Mø) 是脊髓中的关键免疫细胞.
- 在脊髓损伤 (SCI) 之后,MG激活和Mø透是关键的病理过程.
- 由于标志物重叠,很难区分MG和Mø的亲炎性 (M1类) 和抗炎性 (M2类) 表型.
研究的目的:
- 开发可靠的流细胞计 (FCM) 协议,用于在SCI后区分M1/M2类微质和巨细胞.
- 建立一种分析这些免疫细胞表型在SCI病变发生过程中的不同作用的方法.
主要方法:
- 利用流细胞计 (FCM) 来分析细胞表面和细胞内标记物.
- 优化了FCM以稳定检测受伤脊髓中的微质和巨细胞.
- 使用CD45,CD11b,CD68和CCR7标记表达特征识别了特定的细胞群.
主要成果:
- 开发了一种协议,以区分M1/M2类的MG和Mø表型.
- CD11b+CD45-/低CD68+CCR7+细胞被确定为类似M1的MG.
- CD11b+CD45-/低CD68+CCR7-细胞被确定为M2类MG.
- CD11b+CD45高CD68+CCR7+细胞被识别为类似M1的Mø.
- CD11b+CD45高CD68+CCR7-细胞被识别为M2类Mø.
结论:
- 已建立的FCM方法可以精确识别SCI后的M1/M2类微质和巨细胞.
- 该协议有助于了解不同免疫细胞表型对脊髓损伤的具体贡献.
- 促进了针对SCI的向免疫调节疗法的进一步研究.
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