高度保存的基因因素调节NDM基因表达
Jianfen Xu1,2, Jinnuo Zhu1, Changqing Mei2
1School of Life Sciences, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou, Zhejiang, P.R. China.
研究人员确定了一种调节新德里金属β-乳酸酶 (NDM) 基因的保存DNA序列. 破坏这种序列可以显著减少NDM的产生,并恢复卡巴胺的敏感性,从而提供新的治疗点.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 新德里金属β-乳糖酶 (NDM) 是对卡巴胺抗生素的关键威胁.
- 了解blaNDM基因表达的调节对于开发新疗法至关重要.
研究的目的:
- 为了识别和描述blaNDM基因的调节元素.
- 研究这些元素在NDM生产和碳烯耐药性中的作用.
主要方法:
- 临床隔离物和数据库序列的比较序列分析.
- 生物信息学分析以识别促进体和转录因子结合部位.
- 位点定向的突变发生和基因表达分析 (mRNA和蛋白质).
- 电泳运动转移试验 (EMSA) 来确认蛋白质-DNA相互作用.
主要成果:
- 确定了blaNDM上游保存的110bp序列,其中包含一个核心促进物 (PNDM) 和Arca和ArgR2的结合位点.
- PNDM促进子突变使blaNDM表达率降低了90%以上,并恢复了卡巴胺敏感性.
- 在ArcA和ArgR2结合部位的突变使NDM蛋白质的产生分别减少了24%和32.7%.
- 欧洲安全与安全管理局证实ArcA和ArgR2与已确定地点结合.
结论:
- 保存的110bp序列对于调节blaNDM基因表达至关重要.
- 在NDM生成中,PNDM促进体和转录因子ArcA/ArgR2发挥着重要的作用.
- 这种保存的序列代表了针对NDM产生细菌的新型治疗策略的潜在目标.
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