评估前体MicroRNA (pre-miRNA) 作为一个强大的工具,用于强大的CHO生产细胞生产线开发平台
Li Gao1, Xiaohong Li1, Mengxin Zhang1
1Department of Process Development, RemeGen Co., Ltd, No.56 Beijing Middle Road, Yantai, 264006, China.
Bioprocess and biosystems engineering
|July 15, 2025
概括
前体微RNAs (miRNAs) 增强了中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中难以表达的蛋白质的产生. 这一战略改善了生物制造业的高生产率稳定克隆开发.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 细胞工程 细胞工程
背景情况:
- 中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞对于商业重组治疗性蛋白质生产至关重要.
- 对生物制剂的需求不断增加,需要先进的CHO细胞工程和过程优化.
- 微RNAs (miRNAs) 显示出提高蛋白质产量的潜力,但对过度表达形式的比较是有限的.
研究的目的:
- 系统地比较初级 (pri-miRNAs),前体 (pre-miRNAs) 和成熟的miRNA过度表达策略.
- 评估miRNA应用在稳定细胞系发育中的难以表达的蛋白质.
- 使用集成的miRNA表达来增强CHO细胞中的重组蛋白质表达.
主要方法:
- 构建并评估了三种miRNA过度表达策略:pri-miRNAs,pre-miRNAs和侧边成熟miRNAs.
- 集成的miRNA表达盒带有兴趣的基因 (GOI) 在同一个载体上进行共表达.
- 在稳定的CHO细胞系中评估了双特异性抗体 (BsAb) 和Fc融合蛋白的表达水平.
主要成果:
- 在增强蛋白质表达方面,前miRNA过度表达策略被证明是最有效的.
- 过度表达特定的前miRNAs (例如,premiR-92a,premiR-200a) 显著增加了BsAb和Fc融合蛋白的产量.
- premiR-92a和premiR-483的过度表达导致了更高比例的生产性和稳定的CHO克隆,而不影响产品质量.
结论:
- 预米RNA过度表达是一种优越的策略,可以促进CHO细胞中的重组蛋白质生产.
- 预米RNA与治疗性蛋白质的联合表达简化了稳定的细胞系的产生.
- 这种综合方法为开发强大的生物CHO表达平台提供了有价值的方法.
