多巴胺受体1特异性CRISPRa小鼠表现出被破坏的行为和条纹性基线细胞活动

科学领域:

• 神经科学是一个神经科学.
• 遗传学 是一个遗传学.
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• 状多巴胺受体1 (D1-SPNs) 和腺受体2a (A2A-SPNs) 脊状投射神经元对于运动和奖励行为至关重要.
• 创造选择性的CRISPR-dCas9系统为研究基因表达提供了细胞类型特定的表观基因组操纵.
• 条件转基因Rosa26:LSL-dCas9-p300小鼠使dCas9-p300的Cre驱动的,细胞类型特定的表达成为可能.

研究的目的:

• 为了生成和验证CRISPR-dCas9小鼠线对细胞类型的特定表观基因组操纵在条形体.
• 研究dCas9-p300表达在D1-SPNs和A2A-SPNs中的行为和电生理后果.
• 评估这些线条对研究条纹介导行为机制的有用性.

主要方法:

• 通过将Rosa26-LSL-dCas9-p300与Drd1-Cre和Ador2a-Cre小鼠交叉,产生Drd1-Cre:dCas9-p300和Ador2a-Cre:dCas9-p300小鼠的基因.
• 行为表型,包括对运动,重复行为和奖励学习的评估,如果没有sgRNAs.
• 背状条体D1-SPN的电生理记录,以测量输入阻力和刺激后突触电流.

主要成果:

• 与 littermates相比,Drd1-Cre:dCas9-p300小鼠表现出显著的重复旋转行为,超运动,以及增强的奖励学习能力.
• 与对照组相比,Ador2a-Cre:dCas9-p300小鼠没有表现出任何行为变化.
• 电生理学发现Drd1-Cre:dCas9-p300小鼠D1-SPN的输入阻力和刺激后突触电流幅度增加,表明刺激驱动力更大.

结论:

• 这项研究强调了在研究中使用CRISPR-dCas9小鼠线之前验证CRISPR-dCas9小鼠线的必要性.
• 在Drd1-Cre:dCas9-p300小鼠线证明了潜力调查的分子支柱的刻板印象和奖励学习.
• 通过CRISPR-dCas9进行细胞类型特定的表观基因组操纵,可以揭示条状神经元亚型在行为中的不同角色.