使用弱分区染色学与基于紫外线的过程分析技术 (PAT) 强化腺相关病毒载体8型的制造过程

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 生物加工是一种生物加工.
• 基因治疗制造业 基因治疗制造业

背景情况:

• 复合腺相关病毒载体 (AAV) 生产需要有效地分离完整和空囊,用于基因疗法.
• 当前的离子交换染色学 (AEX) 方法面临着由于负载能力低 (2e13-2e14 体/毫升) 的可扩展性限制,而上游标位不断增加.
• 在AAV净化过程中,单体和膜比树脂更好,以避免扩散限制.

研究的目的:

• 为AAV开发下一代的净化工艺,具有显著更高的负载能力 (>1e15卡司/毫升).
• 为了提高AAV制造中全/空囊分离的可扩展性,稳定性和效率.
• 为了解决当前线性梯度AEX方法在高位AAV生产中的局限性.

主要方法:

• 开发了一种可扩展的弱分区离子交换色谱 (AEX) 方法,使用同位素化.
• 该方法在常用于AAV制造的CIM QA单体上进行了证明.
• 过程优化包括负载条件和基于紫外线的信号自动化.

主要成果:

• 弱分区AEX方法实现了80%以上的全囊纯度和80%以上的基因组产量.
• 与标准线性梯度AEX相比,这种方法使每周期的负载能力提高了10倍以上.
• 处理时间缩短了10倍,促进了快速循环或连续处理.

结论:

• 带有同位素化的弱分区AEX为高位数AAV净化提供了可扩展和高效的解决方案.
• 该方法克服了线性梯度AEX的局限性,提供更高的纯度和产量.
• 这一下一代工艺支持先进基因疗法制造的需求.