结合体外分化和基于细胞分类的高度纯净的小鼠骨髓衍生的基细胞的隔离

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 基细胞是免疫反应至关重要的罕见颗粒细胞,但它们的稀缺性限制了研究.
• 众所周知,介质素-3 (IL-3) 能够促进基基细胞的分化和从骨髓前体扩张.

研究的目的:

• 标准化一种体外协议,用于区分和分离纯鼠基 (mBaso).
• 为研究应用评估差异化mBASO的稳定性和功能.

主要方法:

• 鼠标骨髓前体与IL-3培养了10天,以诱导分化.
• 用细胞分类来分离FcεR1+,CD11c-,c-kit- mBaso的高度纯种群.
• 对排序和未排序的细胞进行了表型分析和功能测定 (IL-33刺激).

主要成果:

• 在10天的体外分化方案中,产生了大量的mBaso.
• 细胞分类实现了>98%的生命mBASO纯度,保留了关键的血统标记物 (FcεR1+,CD11c-,c-kit-).
• 排序的mBASO抵抗了转化为巨细胞的分离,并且对IL-33刺激作出了适当的反应,与未排序的细胞不同.

结论:

• 试验室分化与细胞分类相结合,提供了一种可靠的方法,以获得大量的纯,稳定的小鼠基因细胞.
• 该协议使mBaso的分离能够适用于免疫学和相关领域的详细功能研究.