在配体结合试验中单重对重复分析的评估:在小鼠和NHP模型中使用IFN-γ的案例研究

科学领域:

• 生物标志物发现和开发
• 测试验证和优化 测试验证和优化
• 免疫学和血清学 免疫学和血清学

背景情况:

• 重复分析是生物标志物测定中的标准,但可以突出手动输管的变异性.
• 手动输管的高变化可能表明潜在的测试问题.
• 在生物标志物测定中重复分析的必要性需要重新评估.

研究的目的:

• 评价单重与重复分析对干扰素- (IFN-γ) 试验的可靠性.
• 为了比较测试性能指标,包括准确性,精度和可变性.
• 评估分析师经验对两种分析方法的影响.

主要方法:

• 干扰素马 (IFN-γ) 测定使用酶相关免疫吸收测试 (ELISA) 进行.
• 通过使用小鼠和非人类灵长类动物 (NHP) 血清样本,对50个板进行了评估.
• 分析的关键指标包括最低要求稀释 (MRD),标准曲线线性,替代样本准确性,回收,精度和分析器间的可变性.

主要成果:

• 单重和重复分析显示相对准确性和精度的差异很小 (CV <5%).
• 单重和重复方法生成的标准曲线高度相关 (R2 ≥0.9995).
• 与重复分析 (CVs 5.0-7.5%) 相比,单一分析显示了较低的分析器间变异性 (CVs 1.0-6.5%).

结论:

• 单酸盐分析是生物标志物测定的一种强大而可靠的方法.
• 为简化开发并确保合规性,提出了一种单基试验验证工作流.
• 这项研究支持采用单元分析作为重复方法的可行替代方案.