细胞保留在可扩展的,基于 perfusion 的介质干细胞扩张过程中:一个概念证明

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 细胞培养工程 细胞培养工程
• 生物工艺开发 生物工艺开发

背景情况:

• 在临床应用中,可扩展的人类介质干细胞 (hMSCs) 的生产至关重要.
• 需要加强制造工艺,以满足对hMSCs的需求.
• 在 perfusion 模式下基于微载体 (MC) 的细胞扩张提供了增加细胞产量的潜力.

研究的目的:

• 评估交替触流 (ATF) 和触流深度过 (TFDF) 细胞保留系统在 perfusion 模式下的微载体上用于 hMSC 扩张的适用性.
• 为了比较输液过程与传统的重复批次栽培.
• 评估细胞保留系统对微载体聚合和细胞增殖的影响.

主要方法:

• 在使用微载体的1.8L水箱生物反应器中进行了hMSC扩张.
• 使用ATF和TFDF系统的输液模式与重复批次栽培进行了比较.
• 监测了细胞度,微载体总体大小和细胞剥离.

主要成果:

• 输液和重复批次方法都实现了约2.9 x 10^6细胞/毫升的可活细胞度,扩张因子为41-57.
• ATF系统将微载体的总体大小限制在250微米的中位数,而重复批次的微载体大小为470微米.
• TFDF系统导致显著的细胞剥离微载体,导致球形形成和减少的增殖率.

结论:

• 交替的触流过对于基于微载体的hMSC在 perfusion 中的扩张是可行的,减少了手动处理和污染风险.
• 虽然 perfusion 在本研究中没有提高生产率,但 ATF 系统可以促进媒介交换和为收获洗.
• 需要对更高的微载体度进行进一步的研究,才能充分发挥 perfusion 在 hMSC 制造中的潜力.