使用重组疫苗病毒Tiantan菌株探索山羊病毒N1L基因的功能和致病性
Jialiang Xin1,2, Yaqi Shi3, Qian Du2,4
1Key Laboratory of Animal Disease and Human Health of Sichuan Province, College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu, China.
Frontiers in veterinary science
|July 22, 2025
概括
病毒N1L基因 (gN1L) 显著增强了疫苗病毒 (VVT) 的复制和毒性. 这项研究揭示了gN1L.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 分子生物学分子生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- N1L基因是已知的天花病毒毒性因子,但其在山羊病毒 (GTPV) 中的作用尚不清楚.
- 了解GTPV N1L的功能对于疫苗开发至关重要.
研究的目的:
- 阐明GTPV N1L基因 (gN1L) 的生物学意义和功能作用.
- 为了比较表达gN1L的复合疫苗病毒菌株与野生型VVT的毒性和复制能力.
主要方法:
- 使用同源重组构建复合疫苗病毒Tiantan菌株 (rVVT):删除 (rVVT-ΔvN1L),EGFP插入 (rVVT-vN1Lr) 和gN1L替代 (rVVT-gN1L).
- 对gN1L和vN1L蛋白质同质性和稳定性的生物信息学分析.
- 增长曲线测定,RNA-seq分析 (PI3K/AKT通路) 和体外/体内毒性测定.
- 在宿主组织中测量病毒载量,包括评估血脑屏障的穿越.
主要成果:
- 编码为gN1L的蛋白质与vN1L具有同质性,但预计结构更稳定.
- gN1L显著增强了细胞系 (BHK-21,HeLa,PK-15) 中的VVT复制,并增加了高达133倍的毒性.
- RNA-seq表明PI3K/AKT通路参与复制增强.
- gN1L通过增强质细胞和内皮细胞感染,促进VVT穿越血脑屏障.
结论:
- 与vN1L相比,gN1L是一种强大的毒性因子,可显著增强疫苗病毒复制和毒性.
- gN1L能够促进血脑屏障的穿越,这对了解小病毒病变产生有重要意义.
- 这些发现为开发更安全的减弱的山病毒疫苗提供了洞察力.
