对谷氨和谷氨二硫化物含量进行敏感的酶循环测定
Xinyue Lin1, Yajun Chu1, Qianhe Xu1
1School of Pharmacy, and State Key Laboratory of Applied Organic Chemistry, Lanzhou University, Lanzhou, 730000, China.
Analytica chimica acta
|July 23, 2025
概括
这项研究提出了一种可靠的酶循环方法,用于测量生物样本中的谷氨 (GSH) 和谷氨二硫化物 (GSSG). 新技术有助于在各种样本类型中建立一致的GSH与GSSG比率.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 精确测量谷氨 (GSH) 和谷氨二硫化物 (GSSG) 对于生物研究至关重要.
- 目前的方法在样本准备和分析方面缺乏共识,这阻碍了可靠的量化.
- 需要标准化技术来建立一致的GSH和GSSG水平.
研究的目的:
- 开发和验证一种标准化,敏感和准确的方法来量化GSH和GSSG.
- 建立一个稳定的样本准备和分析协议.
- 在各种生物矩阵中确定GSH和GSSG水平.
主要方法:
- 选N-乙烯胺 (NEM) 作为掩蔽剂和5-硫酸 (SSA) 作为蛋白质去除剂.
- 开发一种酶循环试验,用于GSH和GSSG检测.
- 在细胞系 (HeLa,LO2),小鼠血液和组织中验证该方法.
主要成果:
- 开发的方法准确量化了细胞和小鼠样本中的GSH和GSSG.
- 用布氨酸硫胺 (BSO) 治疗显著降低了细胞中的GSH水平和GSH/GSSG比率.
- 在BSO治疗后观察到肝脏和脏GSH含量显著下降,血GSH约为50μM.
结论:
- 建立了一种敏感而准确的酶循环方法,用于在细胞,组织和血液中检测GSH和GSSG.
- 这种方法有助于在不同样本类型中建立关于GSH与GSSG比率的共识.
- 经过验证的协议提供了一种可靠的方法,用于生物样本中的谷氨分析.
