来自细菌细菌的ZPH13光转化酶在zearalenone转化过程中的表征

科学领域:

• 微生物学 微生物学
• 生物化学 生物化学
• 酶学 是一种酶学.

背景情况:

• 泽拉 (ZEN) 是玉米和副产品中普遍存在的真菌毒素,对人类和动物造成重大健康风险.
• 由于其广泛存在和毒性,控制或消除ZEN污染的有效方法是至关重要的.

研究的目的:

• 为了分离和描述一种能够有效转化ZEN的微生物.
• 识别,表达和设计负责ZEN排毒的酶.
• 为了评估ZEN转化产品的降低毒性.

主要方法:

• 从受污染的料中分离Z1Y3菌株的细菌.
• 鉴定和异质表达ZEN光转移酶基因 (ZPH13).
• 使用Pythia增强稳定性的ZPH13的生物化学表征和蛋白质工程.
• 使用超高性能液体染色学-四极精确质谱学分析转化产品.
• 对转化产品对T-47D人类乳腺管道癌细胞的细胞毒性评估.

主要成果:

• 细菌细菌菌株Z1Y3在15小时内完全转化为5毫克/升的ZEN.
• 重组ZPH13酶在35°C和pH8.0的0.5小时内有效地转化了2μg/mL的ZEN.
• 工程突变N371I和N371T显示了酶活性和稳定性的改善.
• 在这种过程中,ZEN被转化为泽拉伦-酸盐 (ZEN-P).
• 与ZEN.相比,ZEN转化产品对T-47D细胞的毒性显著降低.

结论:

• 一种新的酶,ZPH13,被确定为有效的zearalenone转化.
• 蛋白质工程策略成功提高了酶的性能.
• 的酶解毒提供了一种可行的方法,以减轻食品和动物料中的真菌毒素风险.