使用三色素染料亲和力方法从蛋白中净化酶:性能评估和计算分析
Sina Jamei1, Gholamreza Dehghan1, Hamed Farzi-Khajeh2
1Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology, Department of Biology, Faculty of Natural Sciences, University of Tabriz, 51666-16471 Tabriz, Iran.
International journal of biological macromolecules
|July 24, 2025
概括
研究人员研究了用于工业净化的三酸对象的lyszyme吸附. 反应黄色160显示出最高的容量,而反应红色222从蛋白中实现了优异的酶回收和净化.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 材料科学 材料科学 材料科学
- 化学工程是化学工程的重要组成部分.
背景情况:
- 酶是一种有价值的酶,具有多种工业用途.
- 有效的溶酶分离方法对于其应用至关重要.
- 基于triazine的配体为酶固定和净化提供了潜力.
研究的目的:
- 为了评估溶酶对五种不同基于三酸的连接体的吸附,这些连接体被固定在Sepharose树脂上.
- 为了确定这些配体的吸附能力和净化效率,对lyszyme.
- 通过分子对接来研究lyszyme和triazine连接体之间的结合相互作用.
主要方法:
- 将五种三色素 (反应性红色195,反应性蓝色222,反应性黄色145,反应性黄色160,反应性红色222) 固定在与1,4-diaminobutane功能化的Sepharose树脂上.
- 修改树脂的特征使用技术来确认连接物附着和评估形态.
- 酶吸附实验,以确定从蛋白 (CEW) 的吸附能力和净化效率.
- 分子对接模拟以分析lyszyme和triazine配体之间的结合亲缘关系.
主要成果:
- 反应黄色160显示出最高的溶酶吸附能力 (51.3毫克/毫升).
- 反应式红色222从CEW获得了最高的酶回收 (93.77%) 和净化因子 (16.24倍).
- 形态分析证实了经过修改后的树脂完整性.
- 分子对接揭示了lyszyme和三酸联体之间强烈的结合亲和力,结合能量在 -8.3和 -10.3 kJ/mol之间.
结论:
- 在Sepharose树脂上固定的基于triazine的配体对溶酶吸附和净化有效.
- 配体的选择显著影响吸附能力和净化性能.
- 这种方法显示出强大的潜力可扩展和高效的工业隔离lyszyme.
