聚合和冷解过程对TOSc样本中PRRSVRNA检测的影响
Peng Li1, Onyekachukwu H Osemeke1, Thinh Tran Pham Tien1
1College of Veterinary Medicine, Iowa State University, Ames, IA 50010, USA.
Veterinary sciences
|July 25, 2025
概括
猪生殖和呼吸系统综合征病毒 (PRRSV) RNA检测的桃体口腔擦洗 (TOSc) 受样本处理的影响. 聚合和冷解周期可能会降低检测准确度,特别是对于具有较高Ct值的样品.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 诊断微生物学 诊断微生物学
- 猪健康管理 猪健康管理
背景情况:
- 桃体口腔擦洗 (TOSc) 是一种新且实用的方法,用于检测猪生殖和呼吸系统综合征病毒 (PRRSV) RNA 在母猪中.
- 优化样本处理对于猪病监测中准确的诊断结果至关重要.
研究的目的:
- 评估样本聚合和冷解程序对使用TOSc样本检测PRRSVRNA的准确性的影响.
- 确定聚合比率的可接受极限,以及在TOSc样本处理中最小化解周期的必要性.
主要方法:
- 对PRRSV阳性TOSc样本进行了与负样本的不同聚合比,以评估稀释效应.
- 一组TOSc样本经历了一次冷解周期,以评估其对PRRSVRNA检测的影响.
- 实时逆转录聚合酶链反应 (RT-rtPCR) 用于量化PRRSVRNA并确定CT值.
主要成果:
- 增加的聚合比率导致PRRSVRNA检测概率降低,Ct值增加.
- 具有Ct值> 35的样本在1:3稀释时显示检测概率显著下降,而Ct<35的样本在1:10稀释时保持高检测率.
- 与未经冷解的样本相比,冷解的TOSc样本显示出明显更高的Ct值和数值较低的检测概率.
结论:
- 样本组合和冷解程序都会对TOSc样本中PRRSVRNA检测的可靠性产生负面影响.
- 对于具有低Ct值 (<35) 的样品,可达1:10稀释,但对于具有高Ct值 (>35) 的样品,应避免进行聚合.
- 建议在TOSc样本处理过程中尽量减少结解周期,以保持诊断准确度.
