协议更新:用于从小鼠大脑和胰腺器官中单细胞的多组学分析的高通量scNMT协议
Santiago Cerrizuela1, Oguzhan Kaya1, Lukas P M Kremer1
1Molecular Neurobiology, German Cancer Research Center (DKFZ), 69120 Heidelberg, Germany.
STAR protocols
|July 25, 2025
概括
这项研究详细介绍了一种更新的单细胞核体,甲基体和转录体 (scNMT) 测序协议. 改进的方法提高了在小鼠大脑和胰腺器官中进行多组学分析的吞吐量和数据质量.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 基因组学就是基因组学.
- 神经科学是一个神经科学.
背景情况:
- 单细胞多组学分析使得我们能够深入了解生物.
- 单细胞核细胞,甲基组和转录组 (scNMT) 测序的现有方法在吞吐量和数据产量方面存在局限性.
研究的目的:
- 描述一个更新的scNMT测序协议,用于单细胞的高通量,多组学分析.
- 通过微型反应和先进的协议,提高每个细胞的基因和CpG位点的检测.
主要方法:
- 对小鼠大脑和胰腺器官进行scNMT测序的调整.
- 实施液体处理平台,以实现384井板格式的可扩展性.
- 集成Smart-seq3协议和反应体积小型化.
主要成果:
- 从96口井增加到384口井的吞吐量.
- 每个细胞中检测到的基因和基因组DNA (gDNA) CpG的数量越来越多.
- 建立了正常化策略,以实现最佳的每细胞测序深度分布.
结论:
- 更新后的scNMT协议为单细胞多组学研究提供了一种强大且可扩展的方法.
- 这一进步促进了复杂生物系统中细胞异质性的更全面的分析.


