深度测序与高通量选相结合,可以有效地开发一种依赖pH的高亲和度结合域,针对HER3

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分子生物学分子生物学
• 癌症研究 癌症研究

背景情况:

• 建立了用于开发结合域的体外方法,但生成高亲和度结合剂是耗时的.
• 开发聚焦成熟库需要对绑定表面有详细的了解,从而减缓了该过程.

研究的目的:

• 通过使用深度测序数据,加快高亲和度绑定域的开发.
• 使用高通量选来识别条件绑定域.
• 开发一种针对癌症生物标志物HER3的新型治疗剂.

主要方法:

• 利用从初始选择开始的深度测序数据来指导成熟库设计.
• 使用流细胞计和大肠杆菌显示的高通量查.
• 开发了HER3的高亲和度结合剂,其释放机制取决于pH值.

主要成果:

• 实现了对HER3的结合亲和力增加100倍 (3.3nM在pH7.4时).
• 证明了依赖pH的释放机制,在酸性内体条件下释放 (pH ≈6).
• 与梅坦辛 (DM1) 结合的结合剂,对HER3表达细胞具有特异性细胞毒性 (IC50为2-5nM).

结论:

• 提出的方法有效地开发了条件绑定领域.
• 这种方法加速了针对癌症的向治疗方法的发现.
• 开发的向HER3的结合剂显示出治疗应用的前景.