来自Bifidobacterium adolescentis的固定β-galactosidase BgaC在重复使用周期期间保持稳定性和活性

科学领域:

• 酶技术 酶技术是一种
• 生物技术是生物技术.
• 工业微生物学 工业微生物学

背景情况:

• β-Galactosidases对于乳制品加工至关重要,生产无乳糖产品和益生菌.
• 酶固定对于工业应用至关重要,提高了稳定性,活性和成本效益.
• Bifidobacterium adolescentis β-galactosidase BgaC 是这种应用的目标酶.

研究的目的:

• 为了使Bifidobacterium adolescentisβ-galactosidase BgaC.不活动.
• 描述固定酶的动力和稳定性质.
• 为了比较固定BgaC的性能与其自由形式的工业可行性.

主要方法:

• 再组合的BgaC使用藻酸盐和甲交叉结合的凝来固定.
• 动力参数 (K_M,k_cat,k_cat/K_M) 通过使用正-尼托-β-银酸盐 (ONPG) 来确定.
• 评估了酶活性,pH和温度范围内的稳定性以及可重复使用性.

主要成果:

• 与自由BgaC (2500 ± 3 μM) 相比,固定BgaC的K_M (810 ± 220 μM) 显著降低.
• 固定BgaC显示高k_cat (802s-1) 和k_cat/K_M (990s-1 mM^{-1) 比自由BgaC (分别为209s-1和84s-1).}
• 固定化的酶表现出更广泛的pH活性 (4-10),增强了热稳定性 (40°C最佳),并在12个重复使用周期后保持了69%的活性.

结论:

• 固定BgaC显著增强其酶活性和稳定性.
• 改进的性能,包括可重复使用性,使固定BgaC成为工业应用的强大候选人.
• 这项研究突出了固定BgaC的潜力,使其具有成本效益和高效的乳糖水解和GOS生产.