开发和评估快速和简单的测定方法,以检测米中的α-氨基酶活性

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 食品科学 食品科学 食品科学
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• 使用2-chloro-4-nitrophenyl-6⁵-azido-6⁵-deoxy-β-maltopentaoside的G5方法,是酒造中的大米吉α-amylase活性的官方测定方法.
• 由于担心G5基质未来无法使用,因此需要开发另一种分析方法.
• 现有方法的价值在于它们的速度,简单性和准确性来确定α-氨酶活性.

研究的目的:

• 开发和验证一种替代色素基质测定方法,用于确定大米中的α-氨酶活性.
• 建立一种新的方法 (G7),可以使用与现有的G5方法相同的程序步骤来执行.
• 确保新的测定方法保持了原始方法的快速和简单性,同时解决了基质可用性的问题.

主要方法:

• 开发一种使用4,6-O-乙基-α-4-尼托-马尔托酸 (G7方法) 作为染色基质的新型试验.
• 使用结合酶 (葡萄糖胺酶和α-葡萄糖酶) 来化G7基质.
• 在400nm测量了释放的染色体,与α-氨酶活性直接相关.

主要成果:

• 与G5方法相比,G7方法在41个大米科吉样本 (y = 1.096x,R2 = 0.996) 中表现出极好的精度,可重复性和线性.
• 与G5方法相比,G7方法总是平均产生大约10%的更高活动值.
• 观察到G7到G5测量值的比率 (1.02到1.38) 的变化,受特定的米样本和α-amylase催化特性 (K_m值) 的潜在变化影响.

结论:

• G7 方法是可靠且实用的替代方法,用于量化大米 koji 中的α-氨酶活性,同时保持 G5 方法的效率.
• 从G5方法转换到G7方法的用户应该意识到读数更高的趋势以及可能存在的取决于样本的变化.
• 建议直接比较G7和G5方法之间的测定结果,以确保数据兼容性和准确的解释.