在毛细管电泳中确定绝对注射体积,采用"毛细管-体积-板状平衡 (CVPC) "方法

科学领域:

• 分析化学 分析化学
• 分离科学 分离科学
• 工具分析 工具分析

背景情况:

• 精确的注射体积的确定对于定量毛细血管电泳 (CE) 是至关重要的.
• 依赖于哈根-波西耶方程的传统方法往往不可靠,尤其是在低压或短时间注射的情况下.
• 现有的方法缺乏精度,并且可以在定量CE分析中引入重大偏差.

研究的目的:

• 开发一种自我引用的方法,以在CE中准确地确定绝对注射体积.
• 建立一个独立于压力,时间和粘度测量的校准技术.
• 提供一种实用且广泛适用的解决方案,以提高CE的定量准确性.

主要方法:

• 引入毛细管-体积-板块校准 (CVPC) 方法,使用毛细管体积作为内在参考.
• CVPC方法依赖于简单的单点校准,使用已知的分析物度和检测器响应.
• 使用公式计算注射体积 (V_inj):V_inj = VA/{kCtm),基于易于测量的参数:毛细血管体积 (V),探测器常数 (k),分析物度 (C),峰值面积 (A) 和迁移时间 (tm).

主要成果:

• 在典型的CE条件下,CVPC方法准确地确定了绝对注射量,不确定性低于4%.
• 与商业仪器的基于哈根-波西尤尔的预测器进行比较,发现后者高达120%的高估.
• CVPC 方法成功地消除了传统预测方法所观察到的偏差.

结论:

• CVPC 方法提供了一个强大的,基于第一原则的方法,用于在 CE 中准确地确定注射体积.
• 这种技术简化了校准,只需要检测器常数的确定,并依赖于固定的几何维度.
• CVPC提供了一种实用且广泛适用的解决方案,用于提高毛细管电泳实验的定量准确性.