在整个生命周期中对低体积小鼠血清进行深入和定量蛋白质分析

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 老年学是一门学科.
• 蛋白质组学是指蛋白质组学.

背景情况:

• 在临床前模型中,循环生物标志物对于预测生物衰老和衰老表型至关重要.
• 在纵向小鼠研究中,综合性血清蛋白质学具有挑战性,因为样本数量有限.

研究的目的:

• 开发和验证一种工作流程,用于对小量小鼠血清进行全面的定量蛋白质组分析.
• 确定血清蛋白质组变化和衰老表型之间的关键关联,包括细胞衰老.

主要方法:

• 开发了一种基于纳米粒子 (NP) 的血清处理工作流与质谱 (MS) 相结合.
• 该工作流程在12个月,24个月和30个月的老鼠血清样本上进行了测试.
• 一个48-细胞因子测定被用来补充基于MS的蛋白质组分析.

主要成果:

• 基于NP的工作流增加了3-6倍的蛋白质覆盖率,并显示出高可重复性 (CV<10%).
• 对20μL血清的分析确定了3992个蛋白质组 (平均为2235个),揭示了与衰老相关的变化以及与葡萄糖和身体成分的联系.
• 额外的39种蛋白质使用细胞因子试验量化,仅用1μL血清.

结论:

• 建立了一个强大的工作流程,用于使用可行的体积 (21μL) 的小鼠血清深度定量蛋白质学.
• 这种工作流可以识别数百种与衰老相关的蛋白质,并提供对老化血清蛋白质组的基本见解.
• 这些发现有助于开发老化和老化相关表型的临床前生物标志物.