时间解析的光催化接近性标记揭示了ER蛋白质组动力学,这是UPR-to-apoptosis过渡的基础
Nan Zhou1, Yan Zhang1,2, Peng R Chen1,2
1Synthetic and Functional Biomolecules Center, Key Laboratory of Bioorganic Chemistry and Molecular Engineering of Ministry of Education, Beijing National Laboratory for Molecular Sciences, Department of Chemical Biology, College of Chemistry and Molecular Engineering, Peking University, Beijing 100871, China.
我们开发了CAT-ER,这是一种非遗传方法,用于in situ内质网膜 (ER) 蛋白质组学. 该工具揭示了在压力诱导的亡过程中ER蛋白质组的动态变化,为细胞死亡途径提供了新的见解.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 蛋白质组学是指蛋白质组学.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 细胞内膜网膜 (ER) 是蛋白质处理和压力信号的中心,对于亡至关重要.
- 现有的ER蛋白质组学方法往往缺乏现场信息或需要基因操纵.
- 了解压力期间的ER蛋白质组动态对于了解细胞死亡至关重要.
研究的目的:
- 引入CAT-ER,这是一个新的,非遗传系统,用于in situ ER蛋白质组.
- 为了使ER蛋白质组的时空分析能够在没有基因操纵的情况下进行.
- 为了研究在展开蛋白质反应 (UPR) 期间导致亡的动态ER蛋白质组变化.
主要方法:
- 开发CAT-ER,将一种针对ER的光催化剂与一种化 (thioQM) 探针相结合.
- 使用CAT-ER进行ER蛋白的现场标记和时空分辨率.
- 在多种细胞类型中应用CAT-ER,包括难以转移的细胞类型 (HeLa,Raji,Jurkat,RAW264.7).
主要成果:
- 在ER蛋白丰富方面,CAT-ER表现出高特异性,与酶方法相美.
- 该系统成功地在thapsigargin (Tg) 诱导的UPR过程中对动态ER蛋白质组变化进行了分析.
- 确定了NFIP2作为ER压力的缓解剂,并破坏了EMC2作为亡的延迟因子.
结论:
- CAT-ER是一种多功能,非遗传的工具,用于时空ER蛋白质组分析.
- 这项研究为将UPR与亡联系起来的分子动力学提供了新的见解.
- 在不经遗传修饰的情况下,CAT-ER促进了在各种生物环境中研究ER动态.
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