执行者卡斯帕斯动力学,亡诱导的增殖和免疫细胞死亡的综合实时成像,使用稳定的光记者平台

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 调节细胞死亡 (RCD) 对组织平衡和疾病进展至关重要.
• 目前用于研究RCD的工具在相关生物系统中缺乏时空分辨率.
• 了解RCD机制对于开发新的治疗策略至关重要.

研究的目的:

• 开发和验证一种新的光报告系统,用于实时可视化caspase-3/-7活动.
• 为了能够在2D和3D培养中,包括有机体中,高分辨率追踪亡事件和细胞活力.
• 促进研究细胞死亡的不同模式及其整合.

主要方法:

• 产生表达基于DEVD的生物传感器的稳定细胞系,以检测caspase-3/-7活性和构成性光标记物.
• 为2D和3D细胞培养模型 (包括有机体) 调整报告系统.
• 利用活细胞成像,增殖染料和流细胞计,同时检测细胞死亡和相关过程.

主要成果:

• 该系统允许动态,单细胞分辨率跟踪细胞亡和生命能力丧失.
• 在邻近的细胞中检测出由亡诱导的增殖.
• 通过测量表面calreticulin暴露,使免疫细胞死亡的同时评估成为可能.

结论:

• 开发的光记者系统为实时,高内容的细胞死亡查提供了一个强大的平台.
• 它促进了各种细胞死亡途径的机械解剖,包括细胞亡和免疫细胞死亡.
• 该系统具有适应性,可以通过结合额外的标记物来扩展到研究复杂的,集成的细胞死亡形式.