具有微流体的单对象晶格光板显微镜用于哺乳动物细胞的单分子超分辨率成像

科学领域:

• 生物物理学的生物物理.
• 光学显微镜的使用方法
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 单分子定位显微镜 (SMLM) 提供超高分辨率成像超出了纳米生物研究的衍射极限.
• 光板显微镜通过改善信号到背景并减少光损伤来增强SMLM.
• 格子光板 (LLS) 显微镜提供了卓越的光学分割,特别是在散射样本中,但传统设计存在局限性.

研究的目的:

• 开发和描述一个新的单对象格子光板 (soLLS) 显微镜平台.
• 克服双目标LLS系统的局限性,用于成像具有挑战性的样品.
• 为了展示soLLS平台的增强的3D超分辨率成像能力.

主要方法:

• 在微流体芯片内的反射单对象几何体 (soLLS) 中实现LLS照明.
• 在散射介质中对soLLS传播特性进行定量表征.
• 整合soLLS与点传播函数工程,用于3D超分辨率成像.

主要成果:

• soLLS平台使用单个高数值光圈对象进行照明和检测,简化了设置.
• 在散射样本中,soLLS与高斯光板相比,显示出更高的视野和截面.
• 在多个细胞中实现了多个目标的改进的3D单分子超分辨率成像.

结论:

• soLLS成像平台为难以成像,分散生物样本的超分辨率显微镜提供了强大的解决方案.
• 这项技术扩大了纳米尺度对细胞和细胞间结构和动态的研究范围.
• 该soLLS系统具有重要的潜力,可用于生物学和生物医学中的各种应用.