在Pichia pastoris中复合纳表达:与甘衍生纳相比,结构和功能属性

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 食品科学 食品科学 食品科学
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.

背景情况:

• 对替代蛋白质的日益增长的需求推动了对高效生产方法的研究.
• 罗拉产生的纳 (cNapin) 是一种天然的蛋白质来源,但其生产和加工存在挑战.
• 再组合蛋白质生产提供了一个可扩展的替代方案,以获得特定的蛋白质,如NAPIN.

研究的目的:

• 建立一种可扩展的方法,使用Pichia pastoris.生产复合纳 (rNapin).
• 为了比较rNapin的结构和功能性质与大麻衍生的napin (cNapin).
• 为了优化发酵条件以最大限度地提高rNapin产量.

主要方法:

• 使用Pichia pastoris作为用于重组蛋白表达的宿主.
• 采用了发酵优化,比较了平分体和二分体菌株中的GAP和AOX1促进体.
• 使用循环二元化 (CD) 和纳米差异扫描度学 (nanoDSF) 分析了蛋白质结构.
• 评估功能性质,包括可溶性,乳化活性和发泡性.

主要成果:

• 使用GAP促进剂的发酵优化显著增加了rNapin产量 (2.4倍与AOX1相比).
• 在双胞胎GAP菌株中进行进一步的菌株工程导致rNapin产量的额外增加1.5倍.
• rNapin的二次结构与cNapin相似,但其聚合性增加,热稳定性较低.
• 纳在pH范围内显示出高溶解度和优异的酸性乳化活性,但缺乏泡性.

结论:

• 皮奇亚牧草是一种有效的平台,用于可扩展的rNapin生产.
• 优化发酵和菌株工程对于最大限度地提高重组蛋白质产量至关重要.
• 纳具有有价值的功能性质,特别是溶解性和乳化性,使其成为食品应用的潜在候选者.