毒素淋巴菌的RAD51复合酶是克服DNA复制压力的必要条件,其无活化导致布拉迪佐伊特的分化
Ana M Saldarriaga Cartagena1, Ayelén Aparicio Arias2, Constanza Cristaldi1
1Laboratorio de Parasitología Molecular, Instituto Tecnológico de Chascomús (INTECH), Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET)/Universidad Nacional General San Martin (UNSAM), Chascomús, Prov Buenos Aires, Argentina; Escuela de Bio y Nanotecnologías, CONICET/UNSAM, Chascomús, Prov Buenos Aires, Argentina.
RAD51对于Toxoplasma gondii的复制和基因组稳定性至关重要. 抑制RAD51会扰乱塔基细胞的生长并触发分化,这表明DNA复制应激会影响寄生虫的发展.
科学领域:
- 分子寄生虫学 分子寄生虫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 细胞内寄生虫Toxoplasma gondii的复制率很高,导致DNA复制压力和双链断裂 (DSB).
- 通过非同类末端连接 (NHEJ) 和同类重组修复 (HRR) 来进行DSB修复.
- RAD51是HRR途径中的中心重组酶,对DNA修复至关重要.
研究的目的:
- 为了研究RAD51在T. gondii的tachyzoite复制和基因组稳定性中的作用.
- 描述RAD51枯竭和抑制对寄生虫生长和细胞周期进展的影响.
主要方法:
- 使用辅酶诱导性退化 (AID) 系统对RAD51基因进行内源标记,以创建RH RAD51HA-AID克隆系.
- 在RAD51.1.的辅助诱导敲击 (KD) 中.
- 用RAD51抑制剂B02.02进行治疗.
主要成果:
- RAD51以太基酸盐表达,并形成损伤焦点.
- RAD51 KD导致了非同步的tachyzoite复制.
- B02治疗抑制了寄生虫的生长 (IC50=4.8μM),导致S相停止,并诱导了太基酸到布拉迪酸的分化.
结论:
- 在标准条件下,RAD51对于正常的tachyzoite复制和基因组维护至关重要.
- 在T. gondii的DNA复制压力中,tachyzoites可以诱导分化为bradyzoites.
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