产后早期表达减轻了对Cas9的免疫反应,在小鼠中枢神经系统中
Robert Duba-Kiss1, David R Hampson1,2
1Department of Pharmacology and Toxicology, University of Toronto, Toronto, ON, Canada.
Molecular therapy. Methods & clinical development
|August 14, 2025
概括
在小鼠中早期产后给予编码金黄色葡萄球菌Cas9的腺相关病毒 (AAV) 基因疗法,提高了安全性. 新生儿AAV-Cas9的分娩促进了强壮的表达,而成人分娩导致免疫反应和神经元损失.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 基因治疗 基因治疗
背景情况:
- 基因相关病毒 (AAV) 基因疗法由于病毒颗粒和转基因产品的免疫性而面临挑战.
- 在基因编辑中使用外源蛋白质,如Cas9核酶,加剧了免疫性风险.
研究的目的:
- 调查药物使用时年龄对免疫反应和中枢神经系统 (CNS) 输送AAV编码金黄色葡萄球菌Cas9.9后安全性的影响.
- 为了比较新生儿与成年小鼠的免疫反应和治疗结果.
主要方法:
- 中枢神经系统 (CNS) 给新生儿和成年小鼠注射编码金黄色葡萄球菌Cas9的AAV (使用突触素或细胞巨乳病毒促进剂).
- 在不同时间点评估Cas9表达,微质激活,神经元密度,星球细胞激活,T细胞透和循环抗体.
- 与接受AAV编码EGFP的成年小鼠进行比较,作为对照.
主要成果:
- 新生儿AAV-Cas9注射导致强大的Cas9表达和微质激活,在3个月后持续表达和微质响应消散.
- 成人AAV-Cas9注射导致无法检测的Cas9蛋白,减少神经元密度,以及包括微质/质细胞激活,T细胞透和抗体在内的显著免疫反应.
- 接受AAV-EGFP的成年小鼠没有出现不良反应,这表明观察到的毒性是Cas9特异性的.
结论:
- 服用时的年龄极大地影响了通过AAV传递编辑CRISPR-Cas9基因的安全性和有效性.
- 在使用CRISPR-Cas9.9的儿科基因疗法应用中,非常早期的产后管理可能是一个更安全,更有效的策略.
- 免疫反应,包括基因编辑细胞的细胞毒性消除,是成年AAV-Cas9基因疗法的一个重要问题.
