用免疫组织化学数字图像分析方法在胎盘组织中进行神经发育生物标志物研究的定性-定量评估的创新方法
Caroline Camilo1,2, Luana Martos Vieira3, Gisele Rodrigues Gouveia1,2
1Departamento & Instituto de Psiquiatria, Faculdade de Medicina FMUSP, Universidade de Sao Paulo, Sao Paulo 05403010, Brazil.
Biology methods & protocols
|August 14, 2025
概括
我们开发了一种可靠的数字免疫组织化学 (IHC) 协议,用于分析胎盘神经发育生物标志物. 这种方法增强了图像量化,并减少了研究中的观察者偏见.
科学领域:
- 生物医学工程 生物医学工程
- 发展生物学 发展生物学
- 病理学 病理学 病理学
背景情况:
- 免疫组织化学 (IHC) 对于评估组织中的蛋白质表达至关重要.
- 数字分析为IHC中提高客观性和量化提供了潜力.
- 在胎盘研究中,需要标准化的协议来实现可靠的数字IHC.
研究的目的:
- 开发和验证一个标准化的数字IHC协议,用于对胎盘组织中神经发育生物标志物的定量分析.
- 评估数字IHC协议的可复制性和可靠性.
主要方法:
- 在60个出生时的胎盘组织上使用NovolinkTM聚合物系统开发了一个数字IHC协议.
- 使用Aperio ScanScope XT数字化幻灯片,并使用Positive Pixel Count V9算法分析图像.
- 使用11βHSD2和ANXA1蛋白表达验证了该协议,评估了观察者内部和观察者间的可靠性.
主要成果:
- 数字IHC协议与11βHSD2的光学显微镜有很强的一致性.
- 观察者内部和观察者间的高度一致性 (分别为0.67和0.61) 证实了协议的可靠性.
- 对ANXA1的温和协议 (κw:0.50和0.48) 表明该协议的广泛适用性.
结论:
- 为胎盘神经发育生物标志物建立了一个可复制的数字IHC分析协议.
- 该协议优化了图像量化,并最大限度地减少了观察者偏差,提高了研究可靠性.
- 这种数字方法在胎盘研究中推进了发育生物学和数字病理学.
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