AcrIF11是一种强大的CRISPR特异性ADP-ribosyltransferase,由菌体和等离子体编码
Daphne F Chen1, Leah T Roe2, Li Yuping3
1Department of Bioengineering and Therapeutic Sciences, University of California San Francisco, San Francisco, California, USA.
AcrIF11,一种抑制细菌CRISPR-Cas系统的酶,是一种强效和特定的抗CRISPR蛋白. 它与稳定抑制剂相比具有优势,但其ADP-ribosylation修饰可以被巨型体逆转.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 细菌的CRISPR-Cas系统提供了对菌体的适应性免疫力.
- 菌体对抗CRISPR (Acr) 蛋白进行编码,以逃避CRISPR-Cas免疫力.
- 与稳定抑制剂不同的是,酶性Acrs在体内表征不佳.
研究的目的:
- 为了研究酶体AcrIF11.11的体内功效,特异性和可逆性.
- 为了比较AcrIF11在高准压力下对静态度Acrs的疗效.
- 阐明酶性抗CRISPR机制的优点和局限性.
主要方法:
- 核磁共振 (NMR) 谱学以确定AcrIF11结构和辅因子结合.
- 在体内实验中,模拟了lystic复制和lysogen稳定性的实验.
- 酶性测试以评估ADP-ribosylation的特异性和可逆性.
主要成果:
- AcrIF11结构显示了NAD结合,与ADP-ribosyltransferase (ART) 活性一致.
- 在Pseudomonas aeruginosa中,AcrIF11证明了I-F型CRISPR-Cas系统的强大和特异性抑制.
- 在高CRISPR压力下,AcrIF11的性能优于静态测量抑制剂,并稳定了溶解生成.
- 人类宏观主体成功地从Csy1中去除了ADP-ribose修饰,表明可逆性.
结论:
- AcrIF11是I-F型CRISPR-Cas系统的强大,特定和可逆的酶抑制剂.
- 酶性Acrs在效能和稳健性方面具有优势,但容易发生逆转.
- 了解AcrIF11的机制,可以了解菌体-细菌共同进化的动态.
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