在火中开发和验证实时PCR测定Cochlosoma anatis的实时PCR测定
Rebecca P Wilkes1, Angie Chan1, Nelly Elshafie1
1Willie M. Reed Laboratory, Indiana Animal Disease Diagnostic Laboratory, Purdue University, West Lafayette, IN, USA.
概括
开发了一种新的实时PCR (rtPCR) 试验,用于检测导致家禽疾病的寄生虫Cochlosoma anatis. 这种测试提供了100%的灵敏度和特异性,改善了火中合症的诊断.
科学领域:
- 兽医寄生虫学 兽医寄生虫学
- 分子诊断学 分子诊断
- 禽类的健康 禽类的健康
背景情况:
- 在火和子中,cochlosoma anatis会引起肠道疾病 (cochlosomosis).
- 取消抗原动物药物增加了土耳其产业对C. anatis的担忧.
- 目前的检测依赖于活热矿的光显微镜,限制了准确性.
研究的目的:
- 设计和验证用于检测C. anatis的实时PCR (rtPCR) 试验.
- 建立一个敏感和特定的分子诊断方法,用于可克洛索莫斯病.
主要方法:
- 开发并验证了一种针对C. anatis. 的rtPCR试验.
- 使用连续稀释 (~50副本/反应) 确定检测极限.
- 对其他家禽鞭毛动物 (H. meleagridis,T. gallinarum,T. gallinae) 的评估特异性.
主要成果:
- rtPCR试验显示,每个反应的检测极限约为50个副本.
- 该试验对C. anatis具有高度特异性,没有交叉反应性.
- 与微观检测活生物体相比,灵敏度和特异性为100%.
结论:
- 现在可以获得对C. anatis进行验证的rtPCR试验.
- 这种分子测定提供了准确可靠的检测和可靠的cochlosomosis.
- 该试验可以集成到综合征面板中,用于在火中全面检测肠道病原体.
