"难以表达"单克隆抗体在工业相关条件下的基于CHO的混合站点特定集成系统中的评估

科学领域:

• 生物制药制造业 生物制药制造业
• 分子生物学分子生物学
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.

背景情况:

• 单克隆抗体 (mAb) 序列变化可能会影响生物制药制造效率.
• 评估mAb可开发性和表达性的现有方法缺乏工业相关性.
• 网站特定整合 (SSI) 平台为中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中的mAb表达提供了一致的克隆背景.

研究的目的:

• 应用一种基于SSI的新型表达系统,用于快速生成同源细胞池.
• 在工业相关条件下系统地比较mAb序列变异的表达.
• 了解序列变化如何影响mAb的生产力,稳定性和细胞压力.

主要方法:

• 在CHO细胞中利用一种基于SSI的新型表达系统,在一个月内创建同源细胞池.
• 产生和表达了两个治疗相关的mAbs.的十个序列变体.
• 在批量和养批量培养条件下评估了mAb表达,生产力,域稳定性和内质网膜 (ER) 应力.

主要成果:

• 与野生类型相比,trastuzumab中的八种单个氨基酸突变降低了批次培养中的mAb生产力.
• 三种突变导致了食批量培养中的持久低表达型.
• 突变与变异特异性的域稳定性降低和ER压力增加相关.

结论:

• 工业相关的SSI系统可以有效地用于可开发性工作流程.
• 了解mAb表达的序列决定因素对于改善mAb设计和候选选择至关重要.
• 这种方法加强了生物制药工艺开发中的决策.