使用STORM超分辨率显微镜在初级人类T细胞上直接可视化仿真抗原受体

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 生物技术是生物技术.
• 显微镜的使用方法

背景情况:

• 化学抗原受体 (CAR) T细胞疗法对血液性恶性瘤有希望,并正在探索固体瘤和自身免疫性疾病.
• 准确评估CAR组织和时空表达对于理解CART细胞机制以及评估产品的效能和安全至关重要.

研究的目的:

• 开发和应用一种新的,无标签的方法,用于使用超分辨率显微镜直接进行CAR标签和可视化.
• 为了确定单分子分辨率的人类初级T细胞的CAR表面表达.
• 调查影响CAR表面表达的因素及其对CART细胞激活的影响.

主要方法:

• 针对IgG4向的F(ab) 2片段用于直接CAR标签的应用.
• 使用直接随机光学重建显微镜 (dSTORM) 进行超分辨率成像.
• 将直接CAR检测与CAR T细胞的表型评估相结合.

主要成果:

• 成功检测到针对SLAMF7,BCMA和CD19的CARs的表面表达,背景最小.
• 确定了T细胞亚型,捐赠物质和CAR构造作为影响CAR表面表达的因素.
• 观察到CAR表面表达水平和CART细胞激活状态之间的潜在联系.

结论:

• 一种新的,无标签的超高分辨率显微镜方法提供了对CAR表面表达的洞察力.
• 这种方法可以告知合成免疫受体在CAR T细胞治疗中的应用.
• 有潜力提高CAR T细胞疗法的疗效,预测结果,并提高患者护理.