欧洲两虫的功能遗传学:高效的CRISPR/Cas9编辑揭示了对外周神经系统发育的Ascl1/2.1要求

科学领域:

• 进化的发育生物学 (EvoDevo)
• 遗传学和基因组学 遗传学和基因组学
• 神经科学是一个神经科学.

背景情况:

• 由于它们的遗传位置,两动物 (脑弦动物) 对于理解脊椎动物特征演变至关重要.
• 以前的功能遗传研究仅限于特定的两虫物种 (B. floridae,B. belcheri).
• 在其他两动物模型中,如B. lanceolatum,存在对先进遗传工具的需求.

研究的目的:

• 为了建立一个CRISPR/Cas9基因组编辑协议在欧洲的两,Branchiostoma lanceolatum.
• 通过向参与神经元发育的基因来证明该协议的有效性.
• 作为一个EvoDevo模型,为未来的B. lanceolatum功能基因组研究奠定基础.

主要方法:

• 开发一种基于CRISPR/Cas9的基因组编辑协议,用于B. lanceolatum.
• 微注射sgRNA/Cas9复合体到受精卵和双细胞胚胎中.
• 针对Bl-Ascl1/2.1基因,这是一个调节表皮感官神经元 (ESN) 发育的bHLH转录因子.

主要成果:

• 在B. lanceolatum.中成功生成F0马赛克突变体 ().
• 证明了Bl-Ascl1/2.1基因的破坏,导致ESN的损失.
• 通过mRNA微注射确认了表型的特异性和救援.

结论:

• 这项研究成功地确定了B. lanceolatum的CRISPR/Cas9基因编辑.
• 这种方法有效地产生突变并研究该物种的基因功能.
• 现在,B. lanceolatum是使用先进的遗传工具进行未来EvoDevo研究的可行模型.