在双相环境中选反应的FACS可分类的三重乳液图反应器
Samuel Thompson1, Yanrong Zhang2, Zijian Yang3
1Department of Genetics, Stanford University, Stanford, CA 94305, USA.
概括
双相反应的高通量选是通过新型三重乳液图反应器实现的. 这些微流体反应器与光激活细胞分类 (FACS) 兼容,可快速分析数以百万计的皮科升反应.
科学领域:
- 生物化学 生化学
- 化学工程是化学工程的重要组成部分.
- 微流体学 微流体学
背景情况:
- 双相反应为基质溶解性和催化剂活性提供了优势,在单溶剂失败的情况下.
- 这种反应的高通量选具有挑战性,但对于发现至关重要.
- 微流体平台,特别是双重乳液,为皮科升级反应选提供了一个有前途的途径.
研究的目的:
- 开发和验证FACS可分类的三重乳液图反应器,用于选双相反应.
- 为了优化溶剂相和表面活性剂,实现稳定,多小时的两相反应封装.
- 为了证明这些皮克反应器对于无细胞蛋白质合成和酶分析的实用性.
主要方法:
- 开发三重乳液滴与碳外和水中八醇核心的三重乳液.
- 表面活性剂的选,以确保八醇在水中乳液核心的稳定性.
- 使用光激活细胞分类 (FACS) 封装无细胞蛋白质合成和随后的分类.
- 使用原基质进行滴液内脂酶试验的演示.
主要成果:
- 稳定的三重乳液图反应器被生成,24小时后70%以上的存活率.
- 蛋白质的生产是在皮科反应器的双相核心内实现的.
- 商业FACS能够在100Hz以上的光标记图反应器中进行高通量分类,并具有高回收率 (75-80%).
- 成功证明了脂酶活性的滴液内酶定量.
结论:
- 可分类FACS的三重乳液图反应器为两相反应的高通量选提供了一个强大的平台.
- 这些图反应器与无细胞蛋白质合成和酶分析相容.
- 该技术具有选催化剂库的潜力,包括生物燃料生产等应用的酶.


