使用多重化量子基因高通量选平台识别mRNA处理的选择性小分子调节器

科学领域:

• 分子生物学
• 药物发现
• 测试开发

背景情况:

• 高通量查 (HTS) 使用多重化,基于细胞的测试对于识别生物过程的调节者至关重要.
• 发现调节mRNA处理的小分子需要敏感和特定的选平台.

研究的目的:

• 开发一个多重的,基于珠的HTS测定,同时量化多个目标基因转录.
• 在Luminex平台上使用新型QuantiGene测试来识别mRNA处理的选择性小分子调节剂.

主要方法:

• 在Luminex平台上开发了一种基于珠子的多重化QuantiGene试验,用于同时定量基因转录.
• 实施双规范化呼叫管道 (基于板块和井) 以减轻选工件和板块变异性.
• 在与疾病相关的细胞系中使用正交四点度反应实时PCR (qPCR) 试验验验证了结果.

主要成果:

• 该测试成功识别了选择性调节参与mRNA处理的单个基因的独特化合物.
• 双重规范化策略减少了虚假阴性结果,并提高了命中确认率.
• 化学动机分析显示已知和新的基架对特定目标进行了丰富,只有5%的活性物体在三个目标中表现出广泛的活动.

结论:

• 开发的多重化HTS平台是一种可扩展和可靠的策略,用于识别mRNA处理的选择性小分子调节器.
• 该试验证明了稳定性和转化相关性,适用于早期药物发现.
• 这些发现突显了该平台对复杂生物通路的高度选择性调节剂的检测能力.