一个重新折叠的标签用于净化从大肠杆菌纳入体中的生物活性重组蛋白质
Bo Zhang1, Tong Wang1, Siyu Ni1
1Jiangsu Key Laboratory of Brain Disease and Bioinformation, Research Center for Biochemistry and Molecular Biology, Xuzhou Medical University, Xuzhou 221004, China.
International journal of biological macromolecules
|August 20, 2025
概括
一种新的67氨基酸融合标签P67显著增强了以大肠杆菌表达的不溶性重组蛋白的重新折叠. 这种蛋白质净化方法提高了生物活性蛋白的产量,也可以净化可溶性蛋白质.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 蛋白质化学 蛋白质化学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 来自大肠杆菌的重组蛋白净化通常会产生不溶性含体 (IB).
- 提高溶解IB蛋白的重新折叠能力对于恢复至关重要.
- 改善蛋白质重新折叠的现有方法存在局限性.
研究的目的:
- 为了评估由生物素依赖的碳氧酶作为纯化IB蛋白的融合标记 (P67) 的保存域.
- 评估P67标签对重组蛋白质的重新折叠效率和产量的影响.
- 为了研究P67标签对其功能的结构要求.
主要方法:
- 一个67氨基酸域 (P67) 被用作IB蛋白的融合标签.
- 在用变质剂溶解后诱导了蛋白质重新折叠.
- 标记和未标记的结构之间比较了生物活性蛋白的产量.
- 研究了标签结构完整性的作用.
- 生物素/斯特雷普塔维丁亲和性染色法用于净化.
主要成果:
- P67标签显著改善了IB蛋白伴侣的重新折叠过程.
- 从透析阶段,标记蛋白质的生物活性蛋白的产量明显高于未标记的蛋白质.
- 标签的有效性取决于其结构完整性.
- 该P67标签促进了使用生物素/链条维丁亲和力的可溶性蛋白质的净化.
结论:
- P67标签是一个有前途的工具,可以增强生物活性重组蛋白质从包容体中的恢复.
- 这种方法为净化不溶性和溶性重组蛋白提供了双重优势.
- P67标签的结构特征是其重新折叠增强能力的关键.


